经直接提取法处理，含干扰物质较多的样品，在两种波长下均无法进行定性和定量分析，含干扰物质较少的样品，在494nm下的检测结果与净化法差异性不大，加标回收率在可信范围内。

基于此，在确保《食品添加剂》课程的主要内容处于稳定状态基础性，与该行业前沿性知识和标准相结合，将其引入教学体系，便于学生时时掌握该行业发展动态，有利于培养学生的创新能力。其中，任务驱动教学法就是以学生为中心的教学方法，实际教学过程中依据学生实际需求及其教学目的展开教学，紧紧围绕任务设计教学活动，促使教学目的与任务相统一，让学生在教学任务中进行交流、互动的学习，有利于发挥学生的认知能力。

声明：本文所用图片、文字来源《食品安全导刊》，版权归原作者所有。相关链接：添加剂，食品，营养。创新教学方法众所周知，我国中职院校是输出各类技能型人才的重要阵地，但部分学生理论水平较低，课堂学习中缺少主动性。又如：在讲解防腐剂苯甲酸时，可以增加气象色谱-质谱联用检测法等检测食品苯甲酸的方法，增加这方面的内容，有利于学生接触食品企业、卫生防疫等食品生产、监督领域添加剂检测最新技术，不仅可以开阔学生的眼界，也能增强相关专业学生的食品添加剂检测能力。如：在学习食品营养强化剂这节内容时，教师可以在课前让学生预习营养强化剂相关知识，包含用途、作用等，组织小组之间进行比赛，看看哪个小组总结得更详细，由老师给予最终的点评和总结。

教师如果想要从学生中获取教学反应，需要设计一系列问题，促使学生积极参与思考、讨论，并重视面向所有学生提出相应的问题，引起学生的共鸣，提升学生的学习能力。在此基础上，教师要引导学生做好课后总结及思考，课后设置思考题目，让学生可以及时复习所学知识，促使学生真正意义上掌握所学知识，激发学生独立思考的能力。这些研究结果为TSPC等传统巾药在肿瘤治疗的临床应用中提供了一定的理论依据。

如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系相关链接：噻唑蓝，二甲胺，一氧化氮，乙酰胆碱酯酶。段玉清等又利用MTT法检测了LSPC对肝癌HepG2细胞的生长抑制作用，采用Hochest33258染色、AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术、彗星实验、JC-1染色、WesLernb10tting法等一系列方法研究了LSPC诱导肝癌HepC2细胞凋亡的作用机制，发现LSPC对人肝癌HepG2细胞增殖有显著抑制作用，并且主要是通过激活线粒体介导的内源性Caspase途径来诱导细胞凋亡，具体表现为染色质同缩、凋亡小体形成等。Xu等研究发现，LSPC能够改善东莨菪碱所致的小鼠学习障碍，并通过抑制脑组织乙酰胆碱酯酶(AChE)活性而提高脑组织内乙酰胆碱(ACh)水平。2.4保护心血管系统高脂血症在动脉粥样硬化(AS)以及南其所致的心脑血管疾病的发生和发展巾起重要作用。

南此可知，LSPC能通过降低肿瘤细胞毒性而对肿瘤细胞的生长有积极抑制效果，也能通过诱导凋产而抑制肿瘤细胞的增殖，在一定程度上将有助于癌症的积极治疗。体内能显著减小瘤体积和减轻瘤重，抑瘤率为55.3％。

2.2提高认知记忆认知障碍(AI)指与学习记忆以及思维判断有关的大脑高级智能加工过程出现异常，从而引起严重学习、记忆障碍，同时伴有失语或失用或失认或失行等改变的病理过程。血浆巾MDA和ET-1含量明显增高，而S0D活性和N0含最明显降低。另外，杜宏等以四甲基噻唑蓝分析了小同浓度LSPC对人肝癌细胞HepG2存活率的影响，采用流式细胞术分析了细胞周期和细胞凋产情况，利用RT-PCR分析了LSPC引起的生长抑制和DNA损伤基因GADD45、GADD153、CADD34表达水平的变化，发现LSPC可诱导HepG2细胞凋亡，抑制其生长，进而促使其凋亡(P＜0.05)，且呈浓度依赖性。针对莲房中特有的有效成分原花青素，国内外学者们就LSPC在Hela肿瘤、肝癌、黑色素瘤等肿瘤细胞抑制方面开展了大量工作，也取得了较好的效果，介绍如下：2.3.1Hela肿瘤Hela细胞是一种宫颈痛细胞，宫颈癌是全球妇女中最常见的恶性肿瘤之一，仅次于乳腺癌而居于第二位，在发展中国家尤为常见，且近年来年轻妇女宫颈痛发病率有升高趋势。

同时LSPC也可通过细胞外信号调控激酶介导的通路活化海马CREB来改善AT大鼠的空间学习记忆能力。另外，Duan等4研究了LSPC抗癌活性的体外试验，发现LSPC可以明显减弱小鼠黑色素瘤B16的细胞毒性。南于黑色素瘤的恶性度较高，临床上容易出现远隔转移，黏膜黑色素瘤不易发现，预后也较差。临床和实验研究表明高脂血症和AS患者的过氧化脂质水平增高，且脂质过氧化与冠心病的发生、发展关系十分密切。

例如，梁慧敏等用MTT法观察了LSPC对人肝癌细胞株SMMC-772l细胞增殖的抑制作用，发现LSPC在0.25～250g/mL的剂量范围内对SMMC-7221细胞凋亡有极显著的抑制作用(P＜0.01)，且抑制率呈浓度和时问依赖性并随浓度增加而增高，这说明LSPC可能通过诱导细胞凋亡而抑制了人肝癌细胞增殖。而近几年来相关的研究发现，原花青素可通过凋亡途径抑制多种肿瘤细胞生长或诱导其死亡，且可拮抗化疗药物对正常细胞的毒性作用，具有较好的抗癌效果。

此外，LSPC还能够降低老年认知障碍大鼠海马诱导型一氧化氮合酶的表达和活性，通过调节海马神经元型一氧化氮合酶磷酸化抑制年龄相关性的N0过表达，增加海马N0-sGC-cGMP信号转导，从而改善AI大鼠的认知功能。而且Hela细胞经LSPC等作用后，细胞形态发生明显的变化，可见凋亡小体，荧光强度增强，细胞呈现凋亡现象。

2.3抑制肿瘤近年来，肿瘤的发病率逐年增高，其死亡率在众多疾病中居首位，特别是恶性肿瘤，目前的治疗手段多为手术切除并放、化疗，这种治疗方式副作用大，患者生存质最差，而且大部分患者治疗效果都较差，患者往往在发病后3～5年内死产，所以人们迫切需要找到一种新的肿瘤治疗手段。药物治疗虽即时效果小错，但存在不同程度的副作用和依赖性。例如，唐瑛等考察了LSPC对高脂血症模型大鼠瘦素和肿瘤坏死因子(TNF-)的影响，发现与对照组相比，高脂血症模型组中血清总胆同醇(TC)、甘油三两旨(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)水平显著升高。生长抑制损伤基因GADD45、GADD153、GADD34表达水平随着LSPC浓度增加而增加，这也说明LSPC可抑制人肝癌细胞HepG2增殖。因此，越来越多的学者关注从天然植物中寻找预防和治疗黑色素瘤的新途径。有实验证实原化青素对皮肤癌、结肠癌、乳腺癌细胞、肺癌、胰腺癌都有预防作用，同时对人口腔鳞痛细胞及涎腺癌细胞也有不同程度的毒性。

此外，周密等采用MTT法测定了TSPC对黑色素瘤B16细胞的体外抑制作用，义以荷黑色素瘤的C57BT/6J小鼠为体内研究对象，通过瘤体积和瘤重测定，探讨了体内抑瘤作用，也发现LSPC体外对黑色素瘤B16细胞有较强的抑制作用，抑制率为87.4％。认知的基础是大脑皮层的正常功能，任何引起大脑皮层功能和结构异常的冈素均可导致认知障碍。

2.3.3黑色素瘤黑色素瘤是由于皮肤或黏膜内的黑色素发生恶性病变而引起的恶性肿瘤。许多研究表明，一氧化氮/非对称性-二甲基精氨酸/二甲基精氨酸-二甲胺水解酶(N0/ADMA/DDAH)途径可能与失眠有关。

以明显减弱小鼠黑色素瘤B16的细胞毒性。2莲房原花青素的主要生理功能2.1改善睡眠随着生活节奏的加快和精神压力的增加，失眠、睡眠不足已成为我国主要的公共卫生问题之一。

2.3.2肝癌许多资料报道LSPC具有较强的抗肿瘤作用，为进一步探讨LSPC抑制细胞增殖的机制，有必要开展LSPC诱导人肝癌细胞株SMMC-7721细胞凋亡的相关研究。而且聂淑科等通过选用自然衰老的认知功能障碍的SD大鼠模型，研究了LSPC对老年脑老化大鼠学习汜忆能力的影响，也发现TSPC可明显改善老年脑老化大鼠的记忆功能。声明：本文所用图片、文字来源《食品工业科技》，版权归原作者所有。这些研究结果均说明LSPC通过增加心肌对瘦素调节的敏感性，降低了血清和心肌组织中TNF-含量，控制着炎症反应，进而发挥对心血管系统的保护作用，也能通过凋节MDA和ET-1含量来保护心血管组织。

许多研究表明，LSPC保护心血管系统的作用机制可能与其抗氧化作用和改善血管内皮功能有关。Xiao等利用健康大鼠和失眠症大鼠模型，探究了莲房原花青素B2对失眠的抑制效果，发现原花青素B2能通过抑制氧化应激而调节N0/ADMA/DDAH途径，进而改善睡眠障碍。

另有研究表明，LSPC还可能通过调节大脑海马组织血红素氧合酶(HO)表达水平来发挥神经保护作用，进而提高认知记忆能力禹华娟等运用纤维素酶和果胶酶对莲房组织进行酶解预处理，探讨了酶法辅助对原花青素提取率的影响，通过正交试验优化了酶解时问、加酶量和酶解温度等提取工艺参数，即纤维素酶添加最为0.7％，果胶酶添加量0.1％，酶解温度55℃，酶解时间2.5h，且优化后的提取工艺与直接醇提法相比，能将原花青素的提取率提高约48％，达到4.334mg/mL。

脉冲超声辅助提取同样可以大大缩短提取时间而提高生产效率，提取效果较好。此外，肖俊松等采用甲醇-水作为提取溶剂，利用同流装置优化了LSPC的提取工艺条件，即甲醇体积分数60％、提取温度60℃、提取时问lh、料液比1:20(m/V)、提取pH2.0，在此条件下原花青素提取率达到7.65％。

目前原花青素主要应用在包括食品、药品和化妆品等领域或行业，且主要来源于葡萄籽和蓝莓等，由于原料成本比较高，加之提取效率低下，使得原花青素价格普遍偏高。微波辅助提取时使用的频率一般都比较高，可以深入到物体内部，对细胞的形态造成破坏，且微波能在短时问内快速高效提升物体温度。因为小孔的形成和胞壁的裂开，外部溶剂更容易渗进细胞，最终使得原花青素被释放出来。使用酶法提取原花青素是一种环境友好型的提取方式，条件温和，耗能低，不会破坏环境，是值得后续继续深入研究的方法。

其中C4-C8连接而成的二聚体分别为B1、B2、B3、B4，C4-C6连接而成的二聚体分别为B5、B6、B7、B8，在8种异构体中B2是活性最强的一个二聚体。原花青素按聚合度划分，一般可分为低聚体(平均聚合度4)和高聚体(平均聚合度＞4)，且低聚体的抗氧化活性远远高于高聚体。

例如，崔倩等利用正交试验优化了莲房中原花青素的最佳提取工艺，即提取温度50℃，提取溶剂60％乙醇，料液比1:30，提取时间30min，在此条件下测定了莲房粉中原花青素的干基含最为7.58％。1.3超声波辅助提取法超声波辅助提取是一项新型的天然产物辅助溶剂提取中较为常见的技术，它利用超声波的空化作用、热效应、机械作用加速细胞壁的破碎，使胞外溶剂更容易进入细胞内，从而促使胞内物质向溶液内渗出，提取效率比较高，在提取原花青素之类的热敏性物质方而展现出了良好的效果。

微波辅助提取法优缺点明显，提取时间因设备差异而小同，少则几分钟多则几十分钟，操作较优越，提取剂仍需用到有机试剂，故也会有一定的溶剂残留风险。有机溶剂一般不被单独使用，原因在于单纯的有机溶剂渗透性差，而水恰好充当着传质剂，因此使用水与有机溶剂混合使用能改良渗透性差的缺点。